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TRAzol伴侣(R1071)

价格: 540.00
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R1071(100次)

TRAzol伴侣

产品说明

TRAzol是经典的总RNA提取试剂,也是各家生物公司、实验人员提取RNA最常用的试剂。东盛生物在使用TRAzol提取的传统方法上,加以改进,推出TRAzol伴侣,简化操作步骤,可在更短时间内获得纯度更高的RNA。本产品可搭配各公司TRIzol及其他基于酸酚/异硫氰酸胍提取原理的RNA提取产品,包括TRIzolTRIzol LSTRI Reagent等,从动物组织、植物组织、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。所得总RNA纯度高,基本不含蛋白质及基因组DNA。提取的RNA可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

 

产品组成

货号

R1071100次)

溶液RPI

36 ml

溶液RW

24 ml

DEPC处理水

20 ml

RNase-free 纯化柱

100

RNase-free 收集管

100

说明书

1

需要自备无水乙醇溶液

 

保存条件

室温保存。

 

注意事项

●  严防操作环境、使用的容器、耗材和试剂的RNase污染。操作过程中勤换手套。

●  第一次使用前应在溶液RPI和溶液RW中加入无水乙醇,加入量为溶液RPI:无水乙醇=32,溶液RW:无水乙醇=14,即每36 ml溶液RPI需要加入24 ml无水乙醇,每24 ml溶液RW需要加入96 ml无水乙醇。

●  使用本产品提取的RNA一般不含有DNA污染。在极少数情况下(与组织pH值等相关),如果有DNA污染而又必须去除,则可以用RNase-freeDNase处理样品。

●  请严格遵照操作步骤操作。

●  不同起始材料用量会影响RNA的产率。

 

操作步骤

第一次使用前应在溶液RPI、溶液RW中加入无水乙醇,加入量请参考瓶上标签。

TRAzolCat. #R1021/R1022的使用手册进行总RNA提取到经氯仿处理得到上清液。

2  缓慢加入0.5倍体积无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀)。将得到溶液和沉淀一起转入纯化柱(纯化柱+收集管)中,4℃ 12,000 rpm离心30 s4℃ 12,000 rpm离心30 s,弃掉收集管中的废液。(若一次不能将全部溶液和混合物加入纯化柱中,可以分两次离心。)

3  向纯化柱中加入500 μl溶液RPI(使用前请先检查是否已按3:2加入无水乙醇,即含40%乙醇),4℃ 12,000 rpm离心30 s,弃废液。

4  向纯化柱中加入500 μl溶液RW(使用前请先检查是否已按1:4加入无水乙醇,即含80%乙醇),室温静置2 min4℃ 12,000 rpm离心30 s,弃废液。

5  重复上步操作,去除残余液体。

6  将纯化柱放回2ml收集管中,4℃ 12,000 rpm空离2 min,去除残余液体。

注意:此步骤目的是将纯化柱中残余的漂洗液去除,离心后将纯化柱在室温放置片刻,或置于超净工作台上通风片刻,以充分晾干。如果有漂洗液残留,可能会影响后续的RT等实验操作。

7  将纯化柱转入一个新的1.5 ml离心管中,加30–100 μl RNase-free ddH2O,室温放置2 min4℃ 12,000 rpm离心2 min

洗脱缓冲液体积不应少于30 μl,体积过小影响回收效率。RNA应保存在-70℃,以防降解。

注意:如果想提高RNA得率,可重复上步操作一次,合并两次得到的溶液。


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